- ϸ°û&»ùÒòÁÆ·¨½üЩÄêÉú³¤Í»·ÉÃͽø£¬£¬£¬£¬£¬ÎªÐí¶àÔÖÖÎÐÔ¼²²¡ÌṩÁË¿ÉÄÜÐÔ¡£¡£¡£¡£Ëæ×Å»ùÒòתµ¼ºÍÐÞÊμ¼Êõ¡¢µÝËÍÔØÏµÒ»ÇС¢Ï¸°û×÷Óý¼¼ÊõµÈÁìÓòµÄ¿ìËÙÉú³¤£¬£¬£¬£¬£¬Ï¸°û&»ùÒòÖÎÁÆÈ¡µÃÁËÍ»ÆÆÏ£Íû£¬£¬£¬£¬£¬ÎªÄÑÖÎÐÔ¼²²¡£¡£¡£¡£¨ÓÈÆäÊÇÓÐÊýÒÅ´«ÐÔ¼²²¡£¡£¡£¡£©ÌṩÁËȫеÄÖÎÁÆÀíÄîºÍ˼Ð÷¡£¡£¡£¡£Ï¸°ûÖÎÁÆÊÇָͨ¹ýÉúÎ﹤³Ì¼¼Êõ£¬£¬£¬£¬£¬Ê¹Óû¼Õß×ÔÌå»òÒìÌåijЩ¾ßÓÐÌØ¶¨¹¦Ð§µÄϸ°ûÌØÕ÷£¬£¬£¬£¬£¬¾ÌåÍâÀ©Ôö¡¢ÌØÊâ×÷Óý´¦Öóͷ£ºó£¬£¬£¬£¬£¬Ê¹ÕâЩϸ°û¾ßÓÐÔöÇ¿ÃâÒß¡¢É±ËÀ²¡ÔÌåºÍÖ×Áöϸ°ûµÄ¹¦Ð§£¬£¬£¬£¬£¬´Ó¶øµÖ´ïÖÎÁƼ²²¡µÄÄ¿µÄ¡£¡£¡£¡£
Ö×ÁöÃâÒßϸ°ûÖÎÁÆÆ¾Ö¤Ï¸°ûÖÖ±ð¾ÙÐзÖÀ࣬£¬£¬£¬£¬ÏÖÔÚÖ÷Òª°üÀ¨£ºCAR-T£¨Ç¶ºÏ¿¹ÔÊÜÌåTϸ°û£©TCR-T£¨¹¤³ÌTϸ°ûÊÜÌåTϸ°û£©CAR-NK£¨Ç¶ºÏ¿¹ÔÊÜÌåNKϸ°û£©TIL£¨Ö×Áö½þÈóÁܰÍϸ°û£©CAR-M£¨Ç¶ºÏ¿¹ÔÊÜÌå¾ÞÊÉϸ°û£©µÈ - ÃâÒßϸ°ûµÄÖØ´óÐÔ£ºÌåÄÚÀ©Ôö¸öÌ廯£¬£¬£¬£¬£¬ÒìÖÊÐÔ²úÁ¿Ð¡¼°Åú´ÎÓÐÏÞÖÆ±¸¹¤ÒÕÖØ´óÆðʼÖÊÁϲî±ð´óÉúÎïѧЧÁ¦ÒÔ¼°Çå¾²ÐÔÆÀ¼ÛÖØ´ó
CGTÒ©ÎïÒ©ÀíҩЧѧÑо¿- Çå¾²Ò©ÀíѧÑо¿Ò©ÎïÔÚÖÎÁƹæÄ£ÄÚ»òÒÔÉϵļÁÁ¿Ê±¶ÔÐÄÀí¹¦Ð§Ç±ÔÚµÄ·ÇÆÚÍûÓ°Ï죻£»£»£»£»Ò»Ñùƽ³£°üÀ¨¶ÔÖÐÊàÉñ¾ÏµÍ³¡¢ÐÄѪ¹Üϵͳ¡¢ºôÎüϵͳµÄÓ°Ï죻£»£»£»£»Æ¾Ö¤²úÆ·ÌØµã£¬£¬£¬£¬£¬¿ÉÄÜÐèÒªÔö²¹¶ÔÆäËûÆ÷¹ÙϵͳµÄÑо¿¡£¡£¡£¡£
- ÌåÍâҩЧѧÑо¿Ï¸°ûÖÎÁÆ£¨ÈçCAR-T£©µÄЧÁ¦¼ì²â£ºÖ×ÁöɱÉËÂÊ»òÔöÖ³ÒÖÖÆÂÊIFN-¦ÃµÄ±í´ïÁ¿CAR-Tϸ°û±íÐÍת±äCAR-TµÄÖÆ±¸ÓëÆÀ¼Û
°¸Àý£ºÖÊÁ£ÔØÌå¹¹½¨½«PD-1 shRNAÕûºÏµ½CARÖÊÁ£ÖУ¬£¬£¬£¬£¬ÔÙͨ¹ýÂý²¡¶¾ÔØÌåתµ¼½øTϸ°û£¬£¬£¬£¬£¬»ñµÃ¾ßÓÐPD-1ĬȻ¹¦Ð§µÄCAR-Tϸ°û¡£¡£¡£¡£Ð§¹ûÅú×¢£¬£¬£¬£¬£¬PD-1µÄÓÐÓÃĬȻÏÔÖøÒÖÖÆÁËÖ×Áö΢ÇéÐεÄÃâÒßÒÖÖÆ×÷Ó㬣¬£¬£¬£¬ÑÓÉìÁËCAR-Tϸ°ûµÄ»î»¯Ê±¼ä£¬£¬£¬£¬£¬´Ó¶ø±¬·¢Á˽ϳ¤µÄÖ×ÁöɪË×÷Óᣡ£¡£¡£PD-1ĬȻµÄCAR-Tϸ°ûÏÔÖøÑÓÉìÁËÆ¤ÏÂǰÏßÏٺͰ×Ѫ²¡ÒìÖÖÒÆÖ²Ð¡ÊóµÄ´æ»îÆÚ¡£¡£¡£¡£Ö¤ÊµPD-1ĬȻ¼¼ÊõÊÇÔö½øCAR-Tϸ°û¶ÔƤÏÂǰÏßÏٺͰ×Ѫ²¡ÒìÖÖÒÆÖ²ÎïÖÎÁÆÐ§¹ûµÄºÏÊʽâ¾ö¼Æ»®[1]¡£¡£¡£¡£´ËʵÑéÖÐÖÊÁ£²âÐòÊÂÇéÍêÈ«ÓÉÃÀ¸ß÷Íê³É¡£¡£¡£¡£
Plasmid containing PD-1 knockdown sequence[4]°¸Àý£ºCAR-Tϸ°ûɱÉËÊÔÑé
CAR-Tϸ°ûɱÉËʵÑéÏÔʾCAR-Tϸ°ûÒÀÀµÐÔɱÉ˽ÏMock-Tϸ°ûÔöÌí - ÌåÄÚҩЧѧÑо¿Ï¸°ûÖÎÁÆÊÜÊÔÎï¿É½ÓÄÉ¿µ½¡×ÔÔ¸Õß¾èÔùµÄÑªÒºÖÆ±¸ ¿É½ÓÄɶ¯ÎïÈªÔ´Ìæ»»²úÆ·¾ÙÐÐһЩ¿´·¨ÑéÖ¤ÐÔÑо¿£¨Proof-of-Concept£© ·ÇÁÙ´²ÊÔÑéÊÜÊÔÎïºÍÁÙ´²ÓÃÑùÆ·µÄÒìͬ¾ùÓ¦ÔÚÐÂÒ©É걨ʱÓèÒÔ˵Ã÷»ùÒòÖÎÁÆÊÜÊÔÎï˼Á¿Éú²úÀú³Ì¡¢Òªº¦ÖÊÁ¿ÌØÕ÷£¨ÈçµÎ¶È£©¡¢ÁÙ´²ÄâÓÃÖÆ¼ÁµÈÒòËØ ÈôÊÇÓÐÖÖÊôÌØÒìÐÔ£¬£¬£¬£¬£¬Ó¦¿¼²ìÆÀ¹ÀÊÜÊÔÎïÔÚ·ÇÁÙ´²Ñо¿ÖеĻîÐÔ ÈôÔØÌå½ÓÄÉÁ˱í´ïÐÔ±êÇ©£¬£¬£¬£¬£¬Ó¦ÆÊÎö±êÇ©¶Ô·ÇÁÙ´²ÊÔÑéÖ§³ÖÐÔµÄÓ°Ïì¼ì²âÒªÁìºÍÆÀ¼ÛÖ¸±êÉúÎï·¢¹â³ÉÏñ£¨Bioluminescent Imaging£¬£¬£¬£¬£¬BLI£© Á÷ʽϸ°ûÊõ£º¼ì²â¶¯ÎïÌåÄÚÖ×Áöϸ°ûµÄÊýÄ¿ Á÷ʽϸ°ûÊõ¡¢ELISA¡¢MSD£ºÖ×ÁöÏà¹ØµÄϸ°ûÒò×ÓµÄת±äÏà¹Ø²ÎÊý£ºÁöÌå»ý¡¢ÁöÖØ¡¢¶¯ÎïÌåÄÚÖ×Áöϸ°û¶¨Ö²²¿Î»ºÍ¶¯ÎïÖÐλ´æ»îÆÚ
- Ä£×Ó×ÊÔ´£ºÏ¸°ûÖÎÁÆÒ©Ð§ÆÀ¼ÛÃâÒß½¡È«Êó + ÊóÔ´Ö×Áöϸ°û£¨Í¬Ô´Ð¡ÊóÄ£×Ó£© ÃâÒßȱÏÝÊó + ÈËÔ´Ö×Áöϸ°û£¨CDXÄ£×Ó£© ÃâÒßȱÏÝÊó + ÁÙ´²Ö×Áö×éÖ¯£¨PDXÄ£×Ó£©ÃâÒßÖØÐÞÊó£¨PBMCºÍHSC£©+ ÈËÔ´Ö×Áöϸ°û£¨ÈËÔ´»¯Ð¡ÊóÄ£×Ó£©ÃâÒßȱÏÝÊó + ÈËÔ´Ö×Áöϸ°û£¨´óÊóÖ×ÁöÄ£×Ó£©ÈÜÁö²¡¶¾Ò©Ð§ÆÀ¼ÛÃâÒß½¡È«Êó + ÊóÔ´Ö×Áöϸ°û£¨Í¬Ô´Ð¡ÊóÄ£×Ó£© ÃâÒßȱÏÝÊó + ÈËÔ´Ö×Áöϸ°û£¨CDXÄ£×Ó£© ÃâÒßȱÏÝÊóÈËÃâÒßÖØÐÞ£¨PBMCºÍHSC£©+ ÈËԴϸ°û£¨ÈËÔ´»¯Ð¡ÊóÄ£×Ó£©Ôλģ×Ó¼°¶¯ÎïÊÖÊõ£¨Ôλģ×Ó£©ºËËáÒ©ÎïҩЧÆÀ¼ÛÃâÒßȱÏÝÊó + ÈËÔ´Ö×Áöϸ°û£¨CDXÄ£×Ó£© ÃâÒßȱÏÝÊó + ÁÙ´²Ö×Áö×éÖ¯£¨PDXÄ£×Ó£© ÃâÒß½¡È«Êó + ÊóÔ´Ö×Áöϸ°û£¨Í¬Ô´Ð¡ÊóÄ£×Ó£©×ª»ùÒòÃâÒß½¡È«Êó + ÊóÔ´Ö×Áöϸ°û£¨×ª»ùÒòСÊóÄ£×Ó£©ÃâÒßÖØÐÞÊó£¨PBMCºÍHSC£©+ ÈËÔ´Ö×Áöϸ°û£¨ÈËÔ´»¯Ð¡ÊóÄ£×Ó£©Ôλģ×Ó¼°¶¯ÎïÊÖÊõ£¨Ôλģ×Ó£©°¸Àý£ºÃâÒßÏµÍ³ÖØÐÞÈËÔ´»¯Ð¡ÊóÄ£×Ó
Raji-lucÓ«¹âËØ±ê¼ÇÁܰÍÁöϸ°ûÓÕµ¼µÄhPBMCÃâÒßÏµÍ³ÖØÐÞСÊóҩЧģ×ÓµÄҩЧÑо¿°¸Àý£ºË«ÌØÒìÐÔCAR-TҩЧÑо¿
Ë«°ÐµãCAR-TÒ©ÎïµÄҩЧÑо¿
CGTÒ©ÎïÒ©´ú¶¯Á¦Ñ§Ñо¿- Ò©´ú¶¯Á¦Ñ§Ñо¿Ë¼Á¿Òªµã̻¶Á¿£º»ùÒòÖÎÁƲúƷӦƾ֤²úÆ·ÏêÏ¸ÌØµã˼Á¿·ÇÁÙ´²Ñо¿ÖеÄÏÖʵ̻¶ÇéÐξÙÐÐÆÊÎöÆÀ¼Û ÉúÎïÂþÑÜ£º»ùÒòÖÎÁƲúÆ·ÉúÎïÂþÑÜÊÇ»ùÒòÖÎÁƲúÆ·ÔÚÌåÄÚ°Ð×éÖ¯ºÍ·Ç°Ð×éÖ¯µÄÂþÑÜ¡¢´æÐøºÍɨ³ýÍÑÂ䣺ÍÑÂäÆÊÎöÓ¦°üÀ¨¶ÔÆäÇãÔþÌåÍâÒòËØÑ¬È¾ÄÜÁ¦µÄ¼ì²âÒ©´ú£¨ÉúÎïÂþÑÜ£©¼ì²â¼¼Êõ³ÉÏñ¼¼Êõ Á÷ʽϸ°ûÊõÃâÒß×黯¼¼Êõ¶¨Á¿PCR¼¼ÊõµÈ°¸Àý£º·Î²¿Ï¸°ûÖÎÁÆÂþÑܵļì²â
qPCRºÍÁ÷ʽϸ°ûÊõ»ñµÃµÄ¼ì²âЧ¹ûÒ»ÖÂ
CGTÒ©ÎïÉúÎïÆÊÎö- ÈÜÁö²¡¶¾²úÆ·µÄÉúÎïÆÊÎöÒªËØ
²¡¶¾ÔØÌåÀà²úÆ·µÄÉúÎïÆÊÎöÒªËØ
ϸ°ûÖÎÁÆÀà²úÆ·µÄÉúÎïÆÊÎöÒªËØ
LNP-mRNAÖÎÁÆÀà²úÆ·µÄÉúÎïÆÊÎöÒªËØ
¹ÑºËÜÕËáÀà²úÆ·µÄÉúÎïÆÊÎöÒªËØ
»ùÒò±à¼²úÆ·µÄÉúÎïÆÊÎöÒªËØ
ÃÀ¸ß÷֧³ÖCGT²úÆ·µÄϵÁÐÆÊÎö¼¼Êõƽ̨PK/TK/BD
? ·´×ªÂ¼Ó«¹â¶¨Á¿PCR£¨RT-qPCR£©
? ¶¨Á¿PCR£¨qPCR£©
? Êý×Ö΢µÎ£¨ddPCR£©
? ·Ö×ÓÔÓ½»-øÁªÆÊÎö£¨H-ELISA£©
? ·Ö×ÓÔÓ½»-µç»¯Ñ§·¢¹âÆÊÎö£¨H-ECL£©
? Ö§Á´DNA£¨bDNA£©ÃâÒßÔÐÔ
? ELISA
? ECL
? Cell-based Assay
? ¿¹Ìå×è¶Ï
? ELISPOT±í´ï²úÆ·£¨Ó°Ï죩
? mRNAˮƽ£º·´×ªÂ¼Ó«¹â¶¨Á¿PCR£¨RT-qPCR£©
? mRNAˮƽÇýµ£º·´×ªÂ¼Ó«¹âÏà¶Ô¶¨Á¿PCR£¨RT-qPCR£©
? ÂѰ×ˮƽ£ºELISA,FIA,ECL,Western blottingÃâÒß¶¾ÐÔ
? Cytokines£ºFACS CBA,ECL,Luminex
? Complements£ºSigle-plex for ComplementsÃÀ¸ß÷CGTÒ©ÎïÉúÎïÆÊÎöЧÀÍÂÄÀú:CAR-T¡¢CAR-NKµÈ¾ùÓÐÀÖ³ÉÖ§³Ö»ñÅúINDµÄÂÄÀú ÈÜÁö²¡¶¾¡¢¹ÑºËÜÕËá¡¢²¡¶¾ÔØÌåÀàµÈ¾ùÓÐÀÖ³ÉÖ§³Ö»ñÅúINDµÄÂÄÀúÓëÊý¼Ò×ÅÃûÒ©ÆóÔÚLNP-mRNAÁìÓòÓкã¾ÃµÄÏàÖú¹ØÏµÃÀ¸ß÷CGTÒ©ÎïÉúÎïÆÊÎöЧÀÍÓÅÊÆ£ºÓµÓÐ×ÔÖ÷֪ʶ²úȨµÄÏÖ³ÉͨÓÃÐ͵ÄNKϸ°ûµÄÉúÎïÆÊÎöÒªÁì ÓµÓÐ×ÔÖ÷֪ʶ²úȨµÄÏÖ³ÉͨÓÃÐ͵ÄTϸ°ûµÄÉúÎïÆÊÎöÒªÁìÓµÓÐ×ÔÖ÷֪ʶ²úȨµÄÏÖ³ÉͨÓÃÐ͵ĸÉϸ°ûµÄÉúÎïÆÊÎöÒªÁì
CGTÒ©Îï·ÇÁÙ´²Çå¾²ÐÔÆÀ¼Û - ϸ°ûÖÎÁÆÒ©ÎïµÄ·ÇÁÙ´²Çå¾²ÐÔÑо¿Ö÷ÒªÕë¶ÔÒ©ÎïDZÔÚµÄÇå¾²ÐÔΣº¦¶øÉè¼ÆÕö¿ª¡£¡£¡£¡£ÔÚ¶¾ÀíѧÑо¿ÖУ¬£¬£¬£¬£¬Ó¦¶Ô»ùÒòÖÎÁƲúÆ·¾ÙÐÐÖÜÈ«µÄÇå¾²ÐÔÆÊÎöÆÀ¹À£¬£¬£¬£¬£¬ÐëҪʱ»¹Ó¦ÆÀ¹Àµ¼Èë»ùÒòµÄ±í´ï²úÆ·µÄÇå¾²ÐÔ¡£¡£¡£¡£»£»£»£»£»ùÒòÖÎÁƲúÆ·Ó¦ÄÜÔÚÏà¹Ø¶¯ÎïÖÖÊôÖÐÓÐÓõ¼Èë/̻¶¡£¡£¡£¡£Ï¸°ûÖÎÁÆ£¨ÈçCAR-Tϸ°û£©µÄ·ÇÁÙ´²Çå¾²ÐÔΣº¦Ö÷Òª°üÀ¨£ºÏ¸°ûÒò×ÓÊÍ·Å×ÛºÏÕ÷£¨CRS£©¿ÉÄæµÄÉñ¾¶¾ÐÔBϸ°ûïÔÌ·ÇÖ×Áö°ÐÏò¶¾ÐÔ£¨on-target/off-tumor£©ÒÆÖ²ÎËÞÖ÷²¡(GVHD)³ÉÁöÐÔ/ÖÂÁöÐÔµÈCGTÒ©Îï·ÇÁÙ´²Çå¾²ÐÔÆÀ¼ÛÄÚÈÝ£ºÒ»Ñùƽ³£¶¾ÀíѧÉúÖ³¶¾ÐÔÉñ¾¶¾ÐÔ¸´ÖÆÐͲ¡¶¾Î£º¦ÃâÒßÔÐÔºÍÃâÒß¶¾ÐÔÒÅ´«¶¾ÐÔÖ°©ÐÔ¾Ö²¿ÄÍÊÜÐԲο¼ÎÄÏ×£º
[1] Yi-Ju Chen, et al. CAR-T: What Is Next? Cancers. 2023 Jan 21;15(3):663.doi: 10.3390/cancers15030663.
[2] Ana Rosa Saez-Iba?ez, et al. Landscape of cancer cell therapies: trends and real-world data. Nat Rev Drug Discov. 2022 Sep;21(9):631-632. doi: 10.1038/d41573-022-00095-1.
[3] Leisheng Zhang, et al. CAR-NK cells for cancer immunotherapy: from bench to bedside. Biomark Res. 2022 Mar 18;10(1):12. doi: 10.1186/s40364-022-00364-6.
[4] Jing-E Zhou, et al. ShRNA-mediated silencing of PD-1 augments the efficacy of chimeric antigen receptor T cells on subcutaneous prostate and leukemia xenograft. Biomed Pharmacother. 2021 May;137:111339. doi: 10.1016/j.biopha.2021.111339.
ЧÀͰ¸Àý
ÃÀ¸ß÷











Éó²é¸ü¶àЧÀͰ¸Àý




